天一湖医者
PCR反应的延伸温度一般选择在70~75℃之间,常用温度为72℃,过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。PCR延伸反应的时间,可根据待扩增片段的长度而定,一般1Kb以内的DNA片段,延伸时间1min是足够的。3~4kb的靶序列需3~4min;扩增10Kb需延伸至15min。延伸进间过长会导致非特异性扩增带的出现。对低浓度模板的扩增,延伸时间要稍长些。
bamboopiggy
延伸温度一般是72度,不需要调整,要调整的是延伸时间,跟你目的片段的长度调整
汤姆卜丽波
延伸温度大概在70-75之间,一般是72