片段很大，约6kb，用了很多高保真酶都p不出来（kod, la taq等），请问还有什么好用的酶推荐吗？

保真性最最强的就是Pfu Ultra 2

对于长片段， Taq酶具有较高的错误率，导致产物3’端出现错配碱基，DNA合成提前结束。这时应该使用一些错配率更低的耐热聚合酶，如klentaq、pfu、rTth、Vent等。从不同文献中可以得到使用双酶系统更有利于长片段DNA的合成。

Taq酶在PCR的过程中活力下降，会增加非特异扩增以及二聚体的出现。这时应该使用缓冲能力较强的缓冲液，使缓冲液的pH值不会降得过低而影响酶活性；也可在PCR体系中添加一些促进剂，以降低退火温度或/和提高聚合酶的稳定性，从而促进长片段扩增的进行；也可稍微降低变性温度，以保证聚合酶的活性。

试试LA-pcr,或者做融合pcr试一下

别考虑什么好的酶，而是考虑你的片段有点大，你分段克隆，然后拼接起来不会好一些。