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PCR特异反应出现假阴性(无扩增产物)现象:正对照有条带,样品无条带 的可能原因

相关实验:单分子 PCR

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宏贝可鲁

PCR特异反应出现假阴性(无扩增产物)

现象:正对照有条带,样品无条带的可能原因

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5 个回答

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n0y0j7

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正对照有条带,说明体系正常,唯一不同就是模板,提取浓度低,或者纯化不完全,含有抑制剂。

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汤姆卜丽波

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程序上没问题是不是操作问题,样品加错了啥的

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天一湖医者

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可能原因:酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA 聚合酶因保存或运输不当而失活,往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。

模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸,造成 DNA 脱嘌呤而影响 PCR 的结果。

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未来9

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可能原因: a)模板:含有Taq 酶抑制剂、杂蛋白,模板上样量低或模板降解 b)引物:引物降解,引物设计不合理 c)试剂:酶失活,buffer 不合适 d)反应条件:退火温度高,延伸时间短

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bamboopiggy

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样品裂解的不完全,或者加样的枪尖有问题,没有加进去。

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