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巢式PCR筛查某种病毒 两次结果不一致,该怎么办?

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llmm790119

我用巢式PCR筛查某种病毒,引物根据5‘UTR区设计。有的这次标本筛查出是阳性的,而再做就阴性了。一般的注意事项都注意了,像混匀、离心、以及防污染的一些措施。而且PC出的挺好,NC阴性。敢问我哪里会出问题呢?希望各位战友多多指教!
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1 个回答

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我是金博士

有帮助
重复性不好,就说明实验失败了。重复地出来才行。PCR能出现问题的地方太多了,你感觉你都注意到了,可能有些地方是错觉。我的建议是,看看做成功的人是怎么操作的,这个主要是用来检查你个人的操作习惯。另外,做好对照,一步步排查。引物啊,模板啊,PCR条件等都会有影响。
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