巢式PCR筛查某种病毒两次结果不一致，该怎么办？

llmm790119

2013-03-21

我用巢式PCR筛查某种病毒，引物根据5‘UTR区设计。有的这次标本筛查出是阳性的，而再做就阴性了。一般的注意事项都注意了，像混匀、离心、以及防污染的一些措施。而且PC出的挺好，NC阴性。敢问我哪里会出问题呢？希望各位战友多多指教！

我是金博士

2013-03-21

有帮助

重复性不好，就说明实验失败了。重复地出来才行。PCR能出现问题的地方太多了，你感觉你都注意到了，可能有些地方是错觉。我的建议是，看看做成功的人是怎么操作的，这个主要是用来检查你个人的操作习惯。另外，做好对照，一步步排查。引物啊，模板啊，PCR条件等都会有影响。

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