扩增产物居然有很长的拖尾现象？

使用Taqman探针做荧光定量PCR的产物一般都会做的很小，100 bp 多点吧，最大也不超过200 bp 的，你用的退火温度是50度，非特异扩增是不可避免的，即使引物的特异性很好，引物二聚体也肯定存在，而且大小和产物接近，所以在电泳的时候出现脱尾现象很正常。 为什么扩增曲线会很好呢？因为使用了Taqman探针，只有特异性扩增产物会产生荧光，把引物二聚体和非特异扩增都屏蔽了，所以扩增曲线会很好！另外，使用Taqman探针做荧光定量是不需要做熔解曲线的，只有用sybrgreen等荧光染料做定量PCR才需要通过熔解曲线来确定扩增的特异性，以判断定量结果是否准确。