土井挞克树
mRNA组就是测某个条件下的mature mRNA,mRNA有一个Poly-A tail,mRNA测序文库构建时,利用「oligo(dT)磁珠能特异结合Poly-A tail」的原理,特异地将mRNA从总RNA中分离出来实现富集。
而「miRNA作用测序」主要是沉默mRNA以实现「调控基因表达」
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「转录组」(Transcriptome)是组织中单个或一组细胞某个状态下DNA转录出的所有RNA集合,所有RNA可分为「编码RNA」(mRNA)和「非编码RNA」(miRNA , piRNA, SiRNA, SnRNA,lncRNA, NAT, eRNA, circ RNA, ceRNAs等等)。
一般所说的「转录组测序」仅指mRNA测序,实际研究中转录组测序按目的不同还会细分,如mRNA测序(Messenger RNAs)、miRNA测序(microRNAs,small RNA中研究的最多的的一种)、lncRNA测序(Long noncoding RNAs)、circRNA测序(Circular RNAs)、【单细胞转录组、空间转录组、三代测序的全长转录组、无比对参考基因组的无参转录组、物种进化相关的比较转录组与泛转录组测序、特定环境的宏转录组等等】。
mRNA组就是测某个条件下上图中的mature mRNA,从上图可看出mRNA有一个Poly-A tail,mRNA测序文库构建时,利用「oligo(dT)磁珠能特异结合Poly-A tail」的原理,特异地将mRNA从总RNA中分离出来实现富集。「mRNA生信分析重点关注」case组和control组之间差异表达基因,也会做基因与蛋白互作、新转录本预测、可变剪切、基因融合等方面分析。
miRNA组
「miRNA作用机制」主要是沉默mRNA以实现「调控基因表达」,植物和动物中作用机制不一样,上图为植物中miRNA的作用机制(剪切以降解mRNA或者抑制翻译)。
「miRNA建库方式」有别于其它组学,主要是利用其长度分布在20 nt左右,文库构建时「切胶回收」该范围的条带,条带中还包含rRNA,siRNA,piRNA,tRNA等非编码RNA,所有后续分析会使用Rfame数据库,miRBASE来剔除非miRNA。
「miRNA生信分析重点关注」case组和control组之间差异表达miRNA,差异表达miRNA的靶mRNA预测,也会功能分析。
Dr_劉医生
测序本身没区别,都是RNA的转录序列;只是RNA的分类不同
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