哦呦呦呦321
2022-06-11
做转座子突变库文库，但酶切 T4连接 反向PCR 一只有非特异性扩增 PCR不出
天一湖医者
2022-06-12
查一下LM-PCR，按照步骤做就好，也有可能是你引物设计的不对，要仔细分析序列。
bamboopiggy
确定你的酶切正确，T4确实能连接上，别的问题不大。
汤姆卜丽波
引物重新设计一下，特异性高了应该就解决了
相关问答
问
DNA环化后连接液为什么要经过回收后再进行PCR反应
相关方法
🔥 重组酶构建质粒
2023-05-26
T4 DNA Ligase
2022-02-10
碱裂解法（质粒提取）
推荐阅读
反向PCR
反向PCR程序
反向PCR的局限
