流式荧光抗体区分肺泡灌洗液的细胞亚群

请教下各位大神，我有4个处理组，每个处理组4只鼠，做流式荧光抗体区分肺泡灌洗液的细胞亚群，除了每只鼠都要做一个混染，每个处理组都要做一组单染吗，每只鼠都要做一个未染色的管吗？

混染、单染和未染色管各管推荐的细胞数量是多少