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外泌体在水凝胶中的释放

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如初R6JY

水凝胶中外泌体的释放,按文献操作:隔天取上清用BCA试剂盒检测释放,取完补充PBS体积,前五天还正常,在第7天左右外泌体浓度开始下降,可能是因为外泌体都在前几天被取完了,但我不理解的是如果要将前几天的总量加到第7天,则会超过负载在水凝胶中外泌体的总量,大家都是怎么测的外泌体释放?是我的方法有问题吗?

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2 个回答

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dxy_mqg1dtg8

有帮助

从你的描述中,我猜测你是在使用水凝胶来固定细胞,并收集水凝胶上的外泌体。在这种情况下,你需要注意一些细节,以确保测量结果的准确性:

1. 在测量前,需要将所有水凝胶上的外泌体充分释放。为此,可以使用一定浓度的洗涤缓冲液来洗涤水凝胶,以收集所有的外泌体。通常来说,需要多次洗涤,并将每次洗涤所得的上清汇总,用于后续的测量。

2. 测量时,需要将每个时间点所得的上清进行分别测量。如果你想计算总释放量,可以将所有时间点的上清体积相加,但需要注意,不同时间点上清中的蛋白质含量可能不同,需要进行相应的校正。

3. 在测量蛋白质浓度时,需要使用合适的方法。BCA试剂盒是一种常用的方法,但它通常用于测量溶液中的蛋白质浓度,而不是外泌体上清中的蛋白质浓度。因此,在使用BCA试剂盒时,需要根据实验情况进行一定的优化,以确保测量结果的准确性。

4. 最后,需要注意实验过程中的一些影响因素。例如,如果细胞在水凝胶上生长不良,可能会导致外泌体的释放量下降。此外,某些外泌体可能会被水凝胶捕捉,而无法被收集。因此,在进行实验时需要注意这些影响因素,以确保测量结果的可靠性。

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土井挞克树

有帮助

用bca试剂盒检测外泌体在凝胶中的释放,然后用pbs补充

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