各位大神，有人做过小扁豆凝集素(LCA)的纯化方法吗？我用DEAE-52不能起到好的纯化效果。

可以用环磁氧粒固定纯化小扁豆凝集素。

以下是一些可能适用于LCA纯化的其他方法：

聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）：LCA在PAGE中可以形成单一的带状结构，可以通过切割凝胶获得纯化的LCA。

亲和层析：LCA可以与糖类配体如丙酸-β-甲酯引物（PAA）等结合，可以使用亲和层析柱进行纯化。

碘化钠分数沉淀：LCA可以在一定的碘化钠浓度下沉淀，可以利用这一特性进行LCA的初步纯化。

纤维素磁珠亲和层析：LCA可以与纤维素磁珠结合，可以使用纤维素磁珠亲和层析进行纯化。

扁豆凝集素粗品的制备:

取扁豆种子100g，去皮磨成粉末，用无水乙醚(1：4，v:v)于4℃浸泡脱脂2次。然后，用含0.15 mol/L NaCl的0.02 mol/L Tris-HCI，pH 7.8缓冲液(1：4，v:v)在4℃下浸提两次每次24小时。 提取液经离心(4℃，10000rpm，30 min)后，弃去沉淀，上清液采用硫酸铵分段盐折法，取饱和度为40％～80％的沉淀，将沉淀溶于0.02mol/L Tris-HCl，pH 7．8缓冲液中得到相应的粗品。[4] 2.2.2 扁豆凝集素的纯化 粗品4℃下充分透析除盐，然后上经0.02mol/L Tris-HCI,pH 7.8缓冲液平衡的DEAE-52阴离子交换柱，充分淋洗后，换用含0.5mol/LNacl的相同缓冲液进行离子线性梯度洗脱，分部收集，流速0.5 ml/min，3 ml/管，经紫外和凝集兔红细胞活性检测后，收集活性部分。此活性部分对0.02 mol/L NaAc-HAc,pH 5.0缓冲液充分透析，然后上用相同缓冲液平衡的CM Fast Flow阳离子交换柱，充分淋洗后，换用含0.5 mol/LNaCl的相同缓冲液进行离子线性梯度洗脱，分部收集，流速0.5 ml/min，3 ml/管，经紫外和凝集兔红细胞活性检测后，收集活性部分。此活性部分用聚乙二醇20 000浓缩后，对含0．15 mol/L NaCl的0．02mol/L Tris-HCl，pH 7.8缓冲液充分透析，并用相同缓冲液平衡Sephacryl S-300柱，然后在FPLC上进行分子筛层析纯化，分部收集，流速为l ml/min，3 ml/管，经紫外和凝集兔红细胞活性检测后,收集活性部分,再过Sephadex G-25柱除盐后得扁豆凝集素纯品。