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细胞铺板以及染色拍照有什么技巧
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参考高分杂志transwell结果图,心中有数,背景颜色,细胞密度,作用时间都要严格掌控,否则图做出来太暗细胞挤到一起就不好。
毛利小五郎的徒弟
铺板要去除板间的气泡,震荡去除,有利于细胞迁徙。
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肿瘤迁移实验:研究肿瘤细胞的迁移能力或特定情况下肿瘤细胞的迁移能力。常用8.0、12.0µm膜,上室种肿瘤细胞,下室加入FBS或某些特定的趋化因子,肿瘤细胞会向营养成分高的下室跑,计数进入下室的细胞量可反映肿瘤细胞的迁移能力。
肿瘤侵袭实验:研究肿瘤细胞的侵袭能力或特定情况下肿瘤细胞的侵袭能力。在聚碳酸酯膜上涂上一层基质胶,模仿细胞外基质,上室种肿瘤细胞,下室加入FBS或某些特定的趋化因子,细胞要把基质消化后才可以从上室迁移到下室,计数进入下室的细胞量测定细胞的侵袭能力。
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在进行肿瘤细胞侵袭迁移实验时,有一些小技巧可以帮助您获得更好的实验结果:
细胞的密度要控制好,避免太稀或太密,以免影响细胞的迁移和侵袭能力。
在细胞铺板前要先将孔板或培养皿内壁涂上胶原或明胶等物质,增加细胞的黏附性。
铺板后,要让细胞充分附着,一般需要培养4-24小时,再加入适当的处理物质。
细胞染色时,要注意染色时间,过长会影响细胞的形态和迁移能力,过短则可能染色不均匀。
拍照时,要选择合适的曝光时间和光源强度,避免因过度曝光或曝光不足导致图像质量不佳。
对于不同类型的肿瘤细胞,适用的培养条件和实验方法可能有所不同,要根据具体情况进行优化。