蛋白纯化问题，换了不同载体，不同感受态，都表达不出目的蛋白

感觉还是你的质粒没有构建好，你可以查查文献，看大家表达这个目的蛋白都用什么载体。

不表达有几个原因：

1.基因中是否有终止子

2.插入基因是否错位

3.片段是否过长 100kd？表达不出来！可以考虑截短，表达结构域

4.是否是膜蛋白或细胞毒性蛋白，UniProt数据库看下

5.查下商业化的是否有这个蛋白，或者是不同物种的，做下参考

6.查下文献

7.最好能放个图

1.也许是蛋白表达过低，SDS-PAGE不能发现。2.可能是你用的菌错了

1：质粒是否成功转化到你的宿主菌。2：改变诱导时机和诱导剂浓度，一般当OD值在0.5-0.6时较好。3：也许蛋白已经表达，只是不是已可溶形式表达的。