小鼠小肠固有层淋巴细胞提取细胞量都很少，综合了很多文献中的方法，细胞量依然达不到？求大家的建议。

关键步骤如下：冲洗小肠，纵向剖开，清洗干净，刮绒毛，清洗干净，剪成0.5cm的肠段，离心管中清洗。上皮细胞消化液为10mM EDTA的PBS（会37°预热），37℃ 220r/min消化20分钟，用力甩3次，100μm过滤3次，洗至澄清。固有层消化液为300U/ml的2型胶原酶（赛默飞）和0.08U/ml的2型dispase （罗氏），一般消化液总体积用20ml（会37°预热）。肠段剪碎放入消化液中220r/min消化30分钟，用力甩，40μm过滤，500XG离心5分钟。清洗过程全程为预冷undefinedPBS。大家觉得我哪一步有问题，我自己探索了一个多学期，还是找不到问题所在，最后离心沉淀不实，一拿就飘起来。