如何确保pbmc人源化小鼠的构建成功率？

同问？请问每只小鼠注射多少的CD34细胞合适呢？每ml脐带血能提出多少细胞呢？

1、使用正确数量的细胞

重度免疫缺陷小鼠（比如NSG™）可以被用于移植人类组织或细胞，这些细胞包括自人源 CD34+ 造血干细胞 (HSC) 或外周血单核细胞 (PBMC)。移植时需要考虑被植入细胞的最佳数量：过多的 CD34+ HSC 可能导致贫血，过多的 PBMC 会加速移植物抗宿主病 (GvHD)。但是，如果移植细胞过少则可能导致移植率过低或移植失败。

2、操作太快或太慢

需要注意的是，接受细胞移植的小鼠无法立刻被用于研究。对于人源化 PBMC 小鼠，如果等待时间太久，小鼠可能会在开始研究前就已经病入膏肓。例如，许多研究人员有兴趣使用这些小鼠进行患者来源的异种移植 (PDX) 肿瘤共移植，从而对 T 细胞介导的肿瘤应答开展研究。然而，等到PDX 生长到适当大小再开始研究可能需要耗费数月时间，到那时，小鼠可能已经因为发生 GvHD 而死亡（取决于使用哪种 NSG 变体）。因此，最佳方法是先移植 PDX，然后再注射 PBMC。

3、确保无病原体感染状态

如果计划自行移植 HSC 或 PBMC，除了需要确认受体小鼠的健康状态外，还必须确认供体细胞不含病原体。否则，由于NSG™小鼠存在严重的免疫缺陷，因此会因移植细胞中可能存在的病原体而死亡。