人源化抗体(humanized antibody)技术
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单克隆抗体
单克隆抗体问世以来，在临床诊断、治疗与预防等方面发挥了巨大的作用。但是常用的鼠源单克隆抗 体具有较强的免疫原性，在临床反复应用中会引起人抗鼠抗体（ｈｕｍａｎ ａｎｔｉ －ｍｏｕｓｅ ａｎｔｉｂｏｄｙ，ＨＡＭＡ）反应， 导致半衰期缩短，治疗效果减弱。
鼠源抗体人源化是指利用ＤＮＡ 重组技术和蛋白质工程技术，对抗体基 因进行重组，在保留鼠源抗体对抗原有效结合部位的同时，最大限度地降低非结合部位的鼠源性。这种通 过重组基因所表达的既有鼠源成分，又有人源成分的抗体称为人源化抗体（ｈｕｍａｎｉｚｅｄ ａｎｔｉｂｏｄｙ）。人源化 抗体是通过基因工程制备的，所以又可称为基因工程抗体（ｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙ ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ａｎｔｉｂｏｄｙ）。人源化抗体 的优越性主要表现在于其不会激起快速的抗球蛋白反应。由于Ｆｃ 段来源于人，其能更有效的与人体免疫 系统协同发挥作用。
嵌合抗体
由于９０％的ＨＡＭＡ 是针对抗体Ｃ 区的，设计从分泌鼠ＭｃＡｂ 的杂交瘤细胞基因组中分离功能性ＩｇＶ 区基因，然后与人Ｃ 区基因按一定方式拼接，克隆到表达载体中并转入宿主细胞所制备的抗体称为嵌合 抗体（ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｙ）。这种抗体的Ｆａｂ 区是鼠源的，Ｆｃ 区是人源的。由于整个抗体分子约 ２／３ 部分为人源的，较好地解决了ＨＡＭＡ 反应，延长了抗体在体内的半衰期，改善了抗体药物动力学。 １９８４ 年美国科学家Ｍｏｒｒｉｓｏｎ 等首次将人Ｉｇ 的Ｃ 区基因与鼠源ＭｃＡｂ 的Ｖ 区基因连接，成功表达人－鼠嵌 合抗体以来，基因工程抗体的研究发展迅速。已有多种不同特异性的基因工程抗体经ＦＤＡ 批准进入临床 使用，显示了良好的应用前景。
１畅嵌合抗体的构建与表达
在抗体基因重排过程中，恒定区结构变化较少，通过常规分子克隆技术就可获得恒定区基因ＤＮＡ。鼠源单抗可变区基因的扩增模板可利用杂交瘤细胞总ＤＮＡ，也可提取其ｍＲＮＡ 逆转录合成的ｃＤＮＡ，该方法简单、快速。也可通过建立小鼠可变区的基因文库，再从文库中筛选出目的抗体基因。
嵌合抗体可在骨髓瘤细胞、中国仓鼠卵巢（ＣＨＯ）细胞、大肠杆菌及酵母等细胞中表达。由于嵌合抗 体是完整的抗体分子，需要糖基化才能发挥效应功能。大肠杆菌无糖基化功能，酵母细胞有糖基化功能， 但往往不能使抗体得到完整的糖基化，所以骨髓瘤细胞和ＣＨＯ 细胞是表达嵌合抗体最主要的宿主细胞。 这两种细胞可以组装完整的Ｉｇ 分子，Ｉｇ 表达量可达到１００ ｍｇ／ｍＬ 以上。
