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做实验需要的抗体如何制备?

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dxy_l3h8h19

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3 个回答

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府宅

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抗体制备要点:

1.这个抗体用来做什么实验(ELISA、IHC、Western Blot、IF或者IP等)?(功能性要求)

2.是否已有商品化的抗体可以满足以上功能需求?(便利性要求)

3.抗体需要什么种属来源(兔子、山羊、大鼠或小鼠等)?(抗体属性要求)

4.需要多抗还是单抗?(品质性要求);

5.已具备的抗原信息或材料(抗原信息或材料:CDS序列,重组质粒,重组蛋白、多肽等)?(可能性要求);

6.是否可建立抗体质检方法(标准的阳性标本及实施抗体实验验证的标准方法)?(可评价要求)

7.是否具备抗体生产平台及经验?(可行性要求)。

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dxy_gwrp7ndq

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早期传统的抗体制备方法是将一种天然抗原经各种途径免疫动物,由于抗原性物质具有多种抗原决定簇,故可刺激产生多种抗体形成细胞克隆,合成和分泌抗各种决定簇抗体分泌到血清或体液中,故在其血清中实际上是含多种抗体的混合物,称这种用体内免疫法所获得的免疫血清为多克隆抗体

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txs900416

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楼主需要关注两点,1是抗体说明书,2是抗体的用途。一般抗体说明书会标明抗体适合于哪些实验及适用的稀释比例,然后根据具体实验类型再在合适的溶液中稀释抗体。例如,磁珠分选的稀释液中除了pbs外,一般有0.5%bsa及edta,是为了维持细胞活性及防止细胞聚集,此时单用pbs就不合适

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