生物化学笔记针对王镜岩等《生物化学》第三版 适合以王镜岩《生物化学》第三版为考研指导教材的各高校的生物类考生备考目录第一章概述------------------------------01第二章糖类------------------------------06第三章脂类------------------------------14第四章蛋白质（注1）-------------------------21第五章酶类（注2）-------------------------38第六章核酸（注3）--------------------------------------48第七章维生 ...
Foxp3是控制Treg细胞发育和功能的关键转录因子之一，它的发现是Treg免疫生物学重要的进步，为人们进一步了解Treg功能和作用机制打开了一扇“门”。虽然人们也发现Treg发育和功能也需要其他转录因子如AhR和STAT5的参与，但是Foxp3仍旧是Treg细胞系的主要调节因子。实验表明，在体外或体内诱导初始T细胞表达FoxP3后可以出现Treg样的免疫抑制作用，表明Foxp3是控制免疫抑制分子表达的关 ...
沙滩上美妙的一天？Corona Del Mar这个典型的南加州海滩上美好的一天：晴朗的天空万里无云，蔚蓝而清澈的海水泛起层层海浪拍打着白色的沙滩。两位老人漫步在沙滩上，小孩子在他们前面嬉戏追逐着海鸥。今天的海水看起来那么清澈，沙滩上也没有竖起鲜红的指示牌或者黄色的隔离带警告人们远离被关闭的海滩。这样的景象并非总能看到。由此往北行驶一个半小时，在南加州海岸的另一个著名的地点，这个邻近Malibu Pier的区域最近被自然 ...
本实验采用新型ACQUITY UPC2 Torus 2-PIC色谱柱对奥美拉唑制剂的酸性降解产物进行了分析，活性药物成分顺利的与所有降解产物分离。通过使用ACQUITY UPC2 Torus 2-PIC色谱柱，降解峰获得了良好的分离，并且可通过标准品进样或质谱进行定性。ACQUITY UPC2 Torus色谱柱的两级式键合步骤可确保稳定的保留和广泛的选择性，使此色谱柱系列成为有效的样品分析工具。
（一）药物对肿瘤细胞的抑制效应的MTT法：用培养基将肿瘤细胞调整至2 X108个/L，在96孔板中每孔加入100ul细胞悬液于37℃、5% CO2下培养过夜。次日每孔加入不同浓度的药物100mg/L作为试验组，设加完全培养基不加药物的阴性对照，并用功能明确的药物为阳性对照和0.5%的乙醇溶剂对照。每组均设4-6个复孔（平行孔）、37℃、5% CO2继续培养。培养至12h、24h、48h、实验终止前4-6h加入10ulMTT（5g/L），培 ...
一、实验原理细胞培养可分为原代培养和传代培养。直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养；当原代培养的细胞增殖达到一定密度后，则需要做再培养，即将培养的细胞分散后，从一个容器以1：2或其他比率转移到另一个或几个容器中扩大培养，为传代培养，传代培养的累积次数就是细胞的代数。细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或DMSO作保护剂，这两种物质能提高细 ...
细胞凋亡（Apoptosis），又称细胞程序性死亡（PCD: Programmed Cell Death），是指细胞在一定的生理或病理条件下，遵循自身的程序，自己结束其生命的过程。它是一个主动的，高度有序的，基因控制的，一系列酶参与的过程。细胞凋亡概念提出至今还不到30年的时间，但由于它在保证多细胞生物的健康生存过程中扮演着关键角色，对个体的正常发育及细胞凋亡紊乱在病理学研究中的重要作用，引起了人们对其机制和组分的广泛而深入 ...
PCR检测微量感染因子时，容易因为污染的而导致各种问题，因此，进行PCR操作时，操作人员应该严格遵守一些操作规程，最大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。（1）划分操作区：目前，普通PCR尚不能做到单人单管，实现完全闭管操作，但无论是否能够达到单人单管，均要求实验操作在三个不同的区域内进行，PCR的前处理和后处理要在不同的隔离区内进行：① 标本处理区，包括扩增摸板的制备；②PCR扩增区，包括反应液的配制和PC ...
从二维到三维体内细胞生活在三维环境中。细胞在三维环境中与周围的细胞外基质、其它细胞相互作用，接受各种信号，指导其增殖、分化或迁移等行为。由于生物体的复杂性及技术的限制，多年来人们对细胞行为的研究通常是把细胞从整体中分离，研究其在二维环境中的行为和功能，从而得到对细胞的基本认识。但在二维培养体系下，细胞的形态、分化、细胞与基质间的相互作用以及细胞与细胞间的相互作用与体内生理条件下细胞的行为存在明显差异。近年越来越 ...
ELISA检测系统可谓是免疫学反应应用到科研生产中最为广泛最为灵敏的技术手段。可是在新老手操作过程中总是会出现或大或小的问题,本人在刚开始做ELISA时就面临很多困难,虽然有师兄师姐铺路,但还是常常做得一塌糊涂,比如说花板,假阳性,全显色,全部显色,显色比空白还低......自己也为此苦恼过很长一段时间,随着自己技术水平得提高,或多或少地也掌握了ELISA体系的脾气,也是熟能生巧吧,现在做方阵,做ELISA已是轻车熟 ...
大家都知道进行绝对定量需要标准曲线，有些用户认为进行相对定量时就不需要标准曲线了，可以通过2哪C（t）来计算，但这一计算是有条件的，即所有荧光定量PCR扩增的效率都接近于100%，可以通过实验来证明。但大多数用户并没有进行这样的实验就直接用2哪C（t）来计算了。这是错误的，会得到错误结论。无论是使用自配的试剂还是用商业的荧光定量试剂盒，最好买够试剂，以免进行预实验或正式实验时没有试剂而必需采用其他试剂，由于不同试 ...
采用一系列方法将病毒工程化开发用于疾病治疗已经成为一种新型的应用，该应用广泛的定义为病毒疗法，包括基因治疗的病毒载体(Figure 1)和具有溶瘤细胞功能的病毒(Figure 2)。虽然这些产品大部分都处在临床开发阶段，但是药物作用靶点的多样性以及未来创造财富的机会都是令人鼓舞的。病毒疗法是一门以病毒为基础的技术，一个重要的挑战就是在任何的时间点包括早期的研发，产品的生产，产品的包装上市都能清楚地了解样品的质量和性能 ...
UPC2与MS联用有利于母体化合物和三种羟基代谢物的对映体分离。华法林、6-羟基华法林、7-羟基华法林和8-羟基华法林对映体在5 min内成功分离，普萘洛尔、4-羟基普萘洛尔、5-羟基普萘洛尔和7-羟基普萘洛尔在15 min内成功分离。识别化合物与代谢物的不同手性构型是药物开发过程中至关重要的一步，借助超高效合相色谱可轻松实现。
App CG-003 肿瘤异质性与适应性进化肿瘤基因组学研究揭示肿瘤基因组自身可以发生适应性进化。我们可以根据肿瘤原发与转移组织的基因组重测序数据重构肿瘤基因组的进化距离用于判断突变进化过程是否影响到癌症的原发和转移事件的发生；如果癌症转移前后的基因组体细胞突变和结构变异具有差异性，推断究竟是哪些突变可能是原发肿瘤和转移肿瘤基因组发展起到关键作用的突变，即驱动突变基因（Drivermutation）。根据系统发生 ...
Single-cell RT-PCR单细胞RT-PCR技术创立于1991年，随着时间发展，其技术不断完善，在神经生物学、胚胎发育、免疫学等领域都有进一步发展。1.单细胞的获得第一步是获得单个完整的细胞，注意：快速精确操作，尽量减少在操作中由于外界刺激和时间过长引起的细胞表达上的改变，以及外源RNA和RNA酶的污染；目前常用方法有膜片钳技术，激光显微切割技术（LCM），显微吸管操作和流式细胞仪（FACS）。膜片钳技术是在单细 ...
生物分析实验室有其独特的工作模式和一系列要遵从的法规，当一个机构在选购LIMS系统时，如何在众多的LIMS产品中选出适合自己的LIMS系统，是选择通用型的LIMS还是专业型的LIMS，机构在做决策时需要对产品的功能、市场情况、风险等进行评估，这样才能做出最合适的选择。功能在考虑功能时首选要明确自己的需求，要认识到机构的核心工作和核心职能是什么。对于生物分析实验室来说，最核心的工作和职能是依据法规和客户的要求 ...
细胞培养板作为培养细胞的一种常用和重要的工具，形状、规格、用途多样，你是否也为如何选择适合的培养板而迷茫？你是否正为如何方便、正确的使用培养板而苦恼？你对如何处理培养板是否也有困惑？对不同的培养板各有什么妙用你又有何体会？请看丁香园资深站友总结的「细胞培养板的选择」。细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底（U 型和V 型）；培养孔的孔数有 6、12、24、48、96、384、1536 孔等；根据材质的不同有 Terasaki 板和普通细胞 ...
1．LB(Luria-Bertani)培养液、平板的配制配制每升LB培养液，应在950ml去离子水中加入：细菌培养用酵母提取物（bacto-yeastextract）5g细菌培养用胰化蛋白胨（bacto-tryptone）10gNaCl10g摇动容器直至溶质完全溶解，用5mol/LNaOH(约0.2ml)调节pH值至7.0，加入去离子水至总体积为1L，在151bf/in2(1.034×105Pa)高压下蒸汽灭菌20min。 ...
一.实验步骤1. 组织块称重2. 利用液氮、研钵粉碎组织块3. 加入RIPA缓冲液（每克组织3 ml RIPA），PMSF（每克组织30μl，10 mg/ml PMSF），利用Polytron进一步匀浆（15,000转/分1分钟）维持4℃4. 加入PMSF（每克组织30μl，10 mg/ml PMSF），冰上孵育30分钟5. 移入离心管4℃ 约20,000 g（约15,000转）15分钟6. 上清液为细胞裂解液可分装-20℃保存7. 进行Bradford比色法测定蛋白质浓度8. 取相同质量的细 ...
Small RNA是一大类调控分子，几乎存在于所有的生物体中。Small RNA包括：miRNA、ncRNA、siRNA、snoRNA、piRNA、rasiRNA等等。Small RNA通过多种多样的作用途径，包括mRNA降解、翻译抑制、异染色质形成以及DNA去除，来调控生物体的生长发育和疾病发生。Small RNA转录组测序是鉴定和定量解析small RNA的新方法和有力工具。Roche GS FLXTitanium 、IlluminaHi ...
