基因的体外定点突变是常用的分子实验技术，主要用于研究蛋白质结构与功能关系或者验证 microRNA 与靶基因是否结合。今天为大家介绍下基因突变质粒的构建原理与方法。第一阶段：野生型质粒构建1. 引物设计：根据需要验证的基因序列，设计需要扩增的基因片段引物。引物设计方法如下：（1）引物 F：5’ 端 - 保护碱基序列 + 限制性内切酶 1 酶切位点序列 + 基因正向引物序列 - 3’端（2）引物 R：5’ 端 - 保护碱基序列 + 限制性内切酶 2 酶切位点序列 + 基因反向引物序列 - 3’端通过加入基因组 DNA 模板以及设计 ...

本人毕业工作以来总在学历这方面碰壁，想着自己年龄比同届得人都大就没有考研，早早出来工作是一样得，后来有人跟我说毕业了之后也是可以考研得，只要自己坚持，好多人还一边工作一边考研呢，真的嘛？大家有多少是这样得呀，心态又是什么样得呢？好考嘛？烦恼多嘛？还是说要辞掉工作，专心考研。那样会不会考不上后工作还要重新找（来自丁香园站友@金风相送 1122）图片来源：soogif.com@皓轩学长：你现在纠结的问题，和我当年遇到的问题，一 ...

使用 David database 进行 GO、KEGG 等富集分析你或许比较了解。但它还可以用以大批量搜集基因功能通路相关的文献哦。尤其是当你面对一堆基因需要查阅文献时就知道有多么感激 David database 了。下面以 28 个 gene symbol 的基因列表演示一下过程：打开主页（想直接复制网址的童鞋们，可在生物学霸后台回复基因网址即可），点击 Start Analysis。依次在 Upload 界面按步骤上传列表，Background 界面选择物种，List 界面选 ...

2018 年元旦期间，我们推送了一篇劝大家戒酒的文章。这篇文章在酒圈引起轩然大波，阅读量很快就突破 50 万。来自剑桥的研究团队发现，由于人体酒精代谢相关基因的存在基因型多样性，那些乙醛脱氢酶基因有缺陷的人，酒精代谢产生的乙醛不能降解，会提高多种癌症风险。这就是同样是喝酒，不同的人却有不同反应的原因。其实用药也存在这个问题。中国人基因多态性可致支架内血栓风险增加近 5 倍去年年底发布的《中国心血管病报告 2017》 显示，我国心脑血管疾病 ...

不知各位在漫漫长夜考研复习时，哪句话/哪个人曾给你力量，可以分享给大家共勉。图片来源：soogif.com@ 玉流苏：一直用的自己做的图片做电脑桌面，下面菜单栏那里显示一行字——我若不勇敢，谁替我坚强，有了难事就多想想这句话，「我若不勇敢，谁替我坚强」。开了战就先不要想二战，全力以赴做到极致再说，实在恐慌，存点钱吧，二战基金，我早已成年，父母早就没有义务承担我的花费，二战，再来一年，日渐衰老的父母凭什么要再来为我的蹉跎负担一年。。 ...

有感于当今学术界的治学态度，我觉得有部分科研工作者的科研态度是成问题的。虽然这些人不一定急功近利，不一定高调自大，但是 CNS 如同符咒一般，给他们套上了精神枷锁，更迷惑了一些年轻科学家的心。是的，好文章多多益善，决定了我们在学术界的生存状态，自然也直接与个人收入与生活状态挂钩。但是，文章的多少、文章影响因子的高低就决定了一个科研工作者的成败与否么？请过来人指导一下我们这些年轻的科研者。@星晓：文章能不能发在 CNS，好的 IDE ...

前一段时间遇见初中同学，聊起来工作的时候，知道我是医生，她就顺口来了一句：「那你们每天是不是挺辛苦的啊？」我当时不知道怎么回她，我是要谦虚的说，大家都辛苦呢…… 还是就是老实的告诉她，我们就是很辛苦……后来我觉得，这个话题，还是身为医生护士才最有发言权。所以，大家来说说吧，医生护士到底有多辛苦？（比惨的时候到了…… 哈哈哈）（来自丁香园站友@熊欣欣）@无忌一指灵素：我大年初五主班，犯心绞痛，含服硝酸甘油片。坚持用 word 打印一份病史简要，一 ...

作为医护人员，大家看多了别人的生死，来说说如果是自己的话，会有什么样的选择吧！△ 图片来源：网页截图只是假设哈！@yuzx_zdm： 如果生命真的只剩了 24 小时，想起了俺那未通关的游戏，了！！！......@瑞雪初晴： 我会想方设法不死在亲人面前，我会一个人静悄悄地投身大海，让爱我的亲人脑海里永远存留着我鲜活的面容。@语笑嫣然： 去陪爸爸妈妈，然后在最后的时刻回到 LG 身边，握着他的手死去。@紫妍： 好好地哭一场, 然后买好多的零食，然后出走...@greenb： 如果现在 ...

可能很多小伙伴们会遇到类似的问题，在查某个实验时，如 PCR 实验，发现该实验相关的内容很零散，想集中看完整个实验流程中的各个细节，却总是东找找西找找，很心累。于是，学霸君特意推出实验专题精选内容，每周会不断更新，将每个实验专题进行系统化梳理，可节省大家宝贵的时间，让大家专注于做实验研究。查看方式第一步：打开生物学霸，点击科研宝典，会出现实验专题。第二步：点击实验专题，出现如下各个专题内容。第三步：可点击各个专题。如对 PCR 感兴趣 ...

国务院总理李克强 7 月 4 日主持召开国务院常务会议，确定进一步扩大科研人员自主权的措施，更大释放创新活力。会议指出，要落实习近平总书记在两院院士大会上的重要讲话精神，按照党中央、国务院部署，深化科技领域「放管服」改革，按照能放尽放的要求赋予科研人员更大的人财物自主支配权，充分调动他们的积极性，激发创新活力，壮大经济发展新动能。一是改革科研管理方式。凡国家科技管理信息系统已有的项目申报材料，不得要求重复提供。减少各类检查、评估、 ...

做分子生物学和生物化学实验的同胞们，每天不跑个几块蛋白胶都不好意思说自己做了实验。蛋白胶跑完后，有时我们只需要用肉眼对结果进行分析，而有些时候，则需要借助软件。最常用的电泳条带分析软件非 Quantity One 莫属了。笔者曾请教过实验室的各大师兄师姐，结果无一例外大家都是靠 「肉眼分析」，没办法，笔者只好自己摸索着学习。现在，笔者手把手教你如何用 Quantity One 计算电泳条带的分子量，师兄师姐们也来看一看噢。打开 Quantity ...

昨天看了丁香园一个文章，说自己当初怎么选的学医，理由很多，有数学不好的，有父母劝的。想问问各位同行，如果不考虑这些问题，仅仅是从你最初，或者小时候的想法出发，你会想做什么？开个蛋糕店？还是卖水果？（来自丁香园站友 @吃 rou 不吃草）图片来源：soogif.com@向兔子靠齐吧：排除待遇等其他因素只考虑主观意愿的话，我最初是想学工科的，物理啊电气工程啊只要是动手的都有兴趣，学了医后。。。觉得最初的想法是对的，现在唯一的爱好就是摄影， ...

考研不易。有人为了考研，披星戴月；有人为了考研，猛灌咖啡。无论努力到什么程度，为了梦想，都不过分。你呢？为了考研，你到底有多拼？@dyr321： 怀孕马上七个月。每天晚上11点半睡觉，八点起床，工作早晨八点到下午三点。下班了去大着肚子去自习室，每天都会学习，不知道结果如何，也不在乎结果如何。@ldy0558：最简单的表达：把女朋友考分手了！瘦了十几斤！最后三个月，好像就干了四件事，吃饭睡觉学习上厕所，停止一切体育爱好！以倒数第一的 ...

读博补助少，想不想赚点零花钱呢？还真有一个机会，还不错哦。我们需要这样的文章可以是最新进展，比如 CNS 有啥重磅消息，行业内有啥动态，某某论文被撤回等最新八卦。可以是科学人物，你身边的饶毅教授或是某位历史大咖，你要是能八卦出点新闻，都是欢迎的。可是是趣味研究，动物界的一夫一妻制，在生活中发现美也是可以的。可以是实验类的步骤、心得或经验，当然有图有真相是最好的，至少要有正确的操作流程哦。可以是论文类的写作、投稿等经验，最好是 ...

看到了很多做分子细胞的小伙伴分享了经验心得，今天也想来试着分享一下神经电生理（在此仅指急性脑切片膜片钳技术）方面的一些小经验。实践篇——知其然扎细胞的基本操作步骤：1）配好 ACSF 充氧（tip：氧要饱和！根据实验对象、目的、课题设计等各种主客观情况选用合适的方法技术）2）打开各种仪器。基本就是循环灌流系统（简单地说就是蠕动泵，使脑片记录槽中氧饱和的人工脑脊液不断更换，可防止脑片细菌滋生）、显微观察系统（tip：Olympus ...

实验中发现两个蛋白的表达有调控关系，如何用生信方法确认？以下几步简单粗暴，不得不试 （文字少，全是干图）先看两个蛋白有没有直接相互作用1. 肯定要先试试最著名的 STRING 了。STRING 官网 http://string-db.org。在首页左侧边栏中，选择 Multiple proteins，在右边输入框中输入蛋白名称和研究对象种类。随后不停的 continue，就能看到结果了。根据两个蛋白之间连线的颜色，可以判定两个蛋白的可能相互作用类型（K ...

前段时间在某杂志上，看到这样一篇文献：「词频分析」、「词篇矩阵」和「共现矩阵」说得好高大上，有木有？出于好奇，到 CNKI 按照该文献方法，自己分析了一次。哇塞！真的是如获至宝，在此拿出来跟大家分享一下。01 知网检索选择「高级搜索」，之后的界面由于本人研究「地中海贫血」，就以此为例。当然，你也可以使用诸如糖尿病、高血压，恶性肿瘤…… 大部分科研小犊儿，甚是关心期刊杂志发表情况，在此本人点选了「期刊」，当然，你也可以点选「文献」，根据个人需要吧。根据 ...

摘要在生物领域中经常会遇到找化合物相关的生物文献、专利，甚至是检测一个结构为何物的情况，这对学生物的学生来说简直就是灾难。今天为大家介绍的 PubChem 数据库可以让大家的困扰迎刃而解。PubChem 隶属 NCBI 数据库的子数据库，是专门针对化学结构搜索的数据库，使用方便而且是免费数据库，让初学者走上生物信息检索的巅峰。首先，打开网页。1利用 BioAssay 检测生物相关的文献。在输入框中可以输入化合物的名字或者 CAS 号，点击搜索可 ...

在朋友圈，如果你看到好朋友照顾孩子的一些方法不对，或者疾病应对的方法不对，你会怎么做？有没有觉得两难？说或者不说，感觉都不好？有时候觉得吧，很多人还是很不听你解释的，有种：学医救不了中国人，如此的悲观感受。@Calendra：关系好的就说，关系一般懒得理，有些人嘴上应着，转头就屏蔽你说你八婆，乱说。@职称管家：先不说方式的正确与否。并不是别人难，而是你的心理难。是你的主观意识选择别人的方式不符合你心中的方式，你会选择难受。 ...

本人做 NB 实验有那么一段时时时间了，之前苦于量化 NB 图无门道，走过不少弯路。目前虽软件多多，但无几个简单粗暴有效易上手合我心意的软件，直到偶然机会遇见了IJ 软件 Image J（本人喜欢叫它 IJ 软件 ）。下面为本人总结的量化 NB 图教程（如有错漏，请各位同行大佬批评指正）1. 启动你的大 IJ，打开一张 NB 图，强迫症的我向右拉伸对其一下 NB 图，就出现了左边黑色条条了。 2. 然后将 NB 图转为 8-bit 的灰度图，路径：Image-Type-8bit（把彩色去掉，这里是黑白所以没什么变化 ...