EA玫瑰花环试验
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原理
B淋巴细胞有表面Fc受体,以鸡红细胞作为指示细胞与相应的抗红细胞抗体形成EA,B淋巴细胞可以通过Fc受体与EA形成花环,以此计算B淋巴细胞的数目。Fc受体并非B细胞所特有,中性粒细胞、单核细胞及巨噬细胞表面均有这种受体,但这些细胞可以通过形态学加以区别。此方法简单,目前较常采用,以检测B淋巴细胞的百分率。
材料与试剂
基本同EAC花环试验,只是不需要补体。
操作方法
1.EA悬液的制备 取4%鸡红细胞悬液2ml加入试管中,再加等量的1︰4 000稀释的溶血素,混匀,置37℃水浴中15min,以Hank’s液洗涤2次,再以2mlHank’s液悬浮,为EA悬液。
2.取淋巴细胞悬液0.2ml于试管中,加入等量的4%的EA悬液,混匀,室温或20℃作用30min,1000r/min离心5min,吸弃过多的上清液,置4℃ 2h~4h。
3.固定,制片,染色同EAC花环形成试验。
4.结果判定 同EAC花环形成试验。