【求助】细胞培养基怎么浓集呢?
丁香园论坛
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想用western检测一下刺激后的细胞外释放的蛋白,请教各位高手,怎么浓集培养基呢?
使用冷冻干燥机可以浓集培养基并且保持培养基中的蛋白活性,原理是将含培养基冷冻到冰点以下,使水转变为冰,然后在较高真空下将冰转变为蒸气而除去的干燥方法。培养基可先在冷冻装置内冷冻,再进行干燥。但也可直接在干燥室内经迅速抽成真空而冷冻。升华生成的水蒸气借冷凝器除去。
这种方式的使用的前提是你们实验室要有冷冻干燥机。
这种方式的使用的前提是你们实验室要有冷冻干燥机。
多谢指教!
离心浓缩仪
做WB蛋白质不需要有活性,浓缩后用TCA-丙酮沉淀。如果知道目标蛋白的分子量,可能的话,可以先透析或过滤除盐,再浓缩,效果会好些。
冻结干燥或者用反渗透过滤器都可以。
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