GES(胃癌永生化细胞)传代
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心得如下:
1、 GES长的非常快,而且比较大,呈成纤维细胞样,细胞长得越好,铺的越开。
2、传代一般1:3传,每3天需要再传。
2、永生化细胞,不要等细胞100%汇合再传代,多次这样细胞容易球形增加,还不容易洗掉。
3、用胰酶(0.25%)--EDTA(0.01%)混合消化液消化好些,一般1分钟左右呈球形,即可混悬细胞了。
4、培养液用10%小牛血清的DMEM或1640都可以。
步骤:
吸净培养液,胰酶洗1次,倒尽,加胰酶消化液置于37度,在显微镜下注意观察,细胞变圆后,倒掉消化液,加2毫升培养液,吹打混匀,1:3传代。