调亡细胞的TUNEL的流式细胞仪分析过程
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调亡细胞的TUNEL的流式细胞仪 分析过程为:
1.离心收集细胞,PBS 洗1~2次。
2.1%多聚甲醛低温下固定15min。
3.3ml PBS 洗1次,70%乙醇固定,冰箱内放置1~3天。
4.PBS 轻洗1次。
5.细胞与TdT标记液37℃孵育,时间1~2h。
6.PBS 轻洗1次。
7.细胞在黑暗中37℃与100μl的染色缓冲液孵育30min。
8.含0.1%Triton-X 100的PBS轻洗1次。
9.1ml PBS(含5mg/ml PI,0.1% RNase A)重悬。
10. 流式细胞仪分析红色(PI)对绿色荧光(FITC)的地形图。