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问：我想做肌肉组织的乙酰胆碱酯酶染色，没有详细的步骤及注意事项，请熟悉的前辈们给予指点，不胜感激！
答：1、动物麻醉后4％多聚甲醛（0.1M PB配制）固定。
2、取肌肉组织，用灌注液后固定3h。
3、若做冰冻切片，10％，20％，30％蔗糖脱水，用0.1M PB配制蔗糖。若做石蜡切片，梯度酒精脱水，二甲苯透明，石蜡包埋。
4、冰冻切片或石蜡切片。
5、石蜡切片经脱水后入0.01M PBS，冰冻切片直接入0.01M PBS后加入稀释后的一抗（抗乙酰胆碱酯酶抗体）。
6、洗去一抗，加入荧光二抗。
7、封片观察。
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