酵母遗传学方法10:固定化细胞的肌动蛋白染色
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固定化细胞的肌动蛋白染色
1. 培养细胞到对数生长期(约 107 细胞 /ml )。
2. 直接取 0.1ml 甲醛加到含有 1ml 培养物的离心管中固定细胞(甲醛浓度为 3.7 %;标准母液是 37 %)。
3. 在甲醛中培养细胞 30 分钟或稍长时间。
4. 用 PBS 洗两次,离心 5 分钟收集细胞。
5. 用 50 μ l 的 PBS 悬浮细胞,加 5 个单位的罗丹明或荧光素连接的鬼笔环肽。
6. 用 PBS 洗 3 次,重新悬浮在小体积的封固剂中。
7. 用罗丹明或荧光素滤片观察。