互联网2013-08-19
1.从你叙述的情况我分析是percoll的问题,只有分离效果不好时才会出现中间层红细胞的残留。当然你可以全骨髓培养一下,以证明细胞活力的好坏 2.我用的percoll的配方: percoll原液:8.5% NaCl 9:1 ---percoll稀释液 percoll稀释液:0.85% NaCl 14:11 ---percoll工作液(可用于分离) 注意:两次稀释都要注意混匀,这很关键 3.percoll工作液和骨髓的比例是1:1-2:1 4.建议用15ml离心管离心,2550rpm,30min,离心后轻拿轻放 5mlpercoll工作液,2.5-4ml骨髓为佳 5.percoll一定要现配现用 6.你可以先用这个方法试试,我的成功率是100%
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