细胞膜上的免疫荧光检测法

间接标记法

1. 制备单细胞悬液；

2. 细胞计数，取出 1×106 个细胞于试管中；

3. 用台盼蓝染色计活细胞数，要求活细胞数 >90～95%；

4. 在试管中加入一抗， （剂量按照说明书的要求） ，孵30育～60 分钟；

5. PBS 洗涤 1～2 次，1500rpm，离心 3 分钟，弃上清；

6. 加入二抗，孵育 20～30 分钟；

7. PBS 洗一次，1500rpm，离心 3 分钟，弃上清;

8. 加 300μ l PBS，上机检测( 若不能及时上机检测，可加1ml1%多聚甲醛固 定，可放置 1 周) 。

直接标记法

1～3同间接标记法

4. 在试管中加入荧光标记的抗体，混匀，孵育 30 分钟；

5. 用 PBS 洗 2 次，1500rpm，离心 3 分钟，弃上清；

6. 加 300μ l PBS(PH=7.4)，上机检测