酶的提纯 purification of enzyme

互联网2013-11-14

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即将酶蛋白质作为纯物质加以提纯。除胞外酶外，通常多数酶可通过对细胞的磨碎、超声波处理、压力的急激变化、酶的分解、细胞自溶等方法从细胞中提取出来。此时，对与不溶性构造连接着的酶，也常需进一步通过多种表面活性物质等，使之溶化后再提取出来。粗提取液中的酶，先通过盐析、沉淀、吸附等操作分成几个部分，然后再通过离子交换层折、电泳、超速离心、分子筛凝胶过滤等加以分离提纯，使某些酶结晶化。在提纯制时，操作前后可测定酶的比活性，使适用于酶的比活性提高的操作。应尽量避免提纯操作时引起酶的变性，通过提纯操作使酶不变性可提高提纯量，酶的比活性提高，最终可得到均一的蛋白质酶制品。酶的提纯不仅为了弄清酶作用的分子机制，而且在对确定生物体内反应过程也具有重要的意义。

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