抗原修复的几种方法
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一、柠檬酸钠法
1. 把玻片放在玻璃固定架上,再将架子放在盛有600ml的10mM柠檬酸钠(pH6.0)的容器中。
2. 微波中高火6-8min。
3. 室温冷却。
4. 用PBS洗涤3次,每次5min。
二、蛋白酶K法
1. 配制新鲜溶液:
25μl 20mg/ml蛋白酶K;
2.5ml 1MTris-HCl(pH8.0);
0.5ml 0.5M EDTA(pH8.0);
加水定容到50ml。
2. 37℃下,将玻片放在架子上孵育5min(蛋白酶K不要预热)。
3. 用PBS洗涤3次,每次5min。
三、尿素法
1. 把玻片放在玻璃固定架上,再将架子放在盛有600ml 的1M尿素(新鲜配制)的容器中。
2. 微波10min,20min或者30min,每5min补充一次蒸发掉的水。
3. 冷却30min到1h。
4. 用蒸馏水洗涤4次,每次3min,再用PBS洗涤3min。