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抗原修复的几种方法

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11019

一、柠檬酸钠法

1. 把玻片放在玻璃固定架上,再将架子放在盛有600ml的10mM柠檬酸钠(pH6.0)的容器中。

2. 微波中高火6-8min。

3. 室温冷却。

4. 用PBS洗涤3次,每次5min。

二、蛋白酶K法

1. 配制新鲜溶液:

25μl 20mg/ml蛋白酶K;

2.5ml 1MTris-HCl(pH8.0);

0.5ml 0.5M EDTA(pH8.0);

加水定容到50ml

2. 37℃下,将玻片放在架子上孵育5min(蛋白酶K不要预热)。

3. 用PBS洗涤3次,每次5min。

三、尿素法

1. 把玻片放在玻璃固定架上,再将架子放在盛有600ml 的1M尿素(新鲜配制)的容器中。

2. 微波10min,20min或者30min,每5min补充一次蒸发掉的水。

3. 冷却30min到1h。

4. 用蒸馏水洗涤4次,每次3min,再用PBS洗涤3min。
 

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