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凝胶柱的清洗问题

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8154

问:最近在回收凝胶柱时(用的是镍柱),经过多次的洗脱液继续平衡清洗,发现还有一些很难去除的杂蛋白,不知应该用什么方法把这些难除的杂蛋白去除?

答:一般用6M盐酸胍+0.2M AC和2%的SDS清洗

一般的柱子都是相同过程,大致顺序如下

1.6M盐酸胍+0.2M AC

2.水

3.2%SDS

4.水

5.乙醇梯度20%-100%-20%,可以任选阶梯型的梯度

6.0.1M EDTA

7.水

7.CHARGE BUFFER

9.水

10.BINDING BUFFER

可以选取其中一部分就行了,不需要每次都做完这个步骤,我认为填料的说明书上应该有写,你可能没注意看

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