酵母RNA的提取及含量测定（地衣酚显色法）
互联网
3210
一、实验目的
（1）熟悉酵母RNA的提取方法
（1）熟悉酵母RNA的提取方法
（2）掌握地衣酚显色法测定酵母RNA含量的原理和方法
二、实验原理
RNA与浓盐酸共热时，即发生降解，形成的核糖继而转变成糠醛，后者与3， 5-二羟甲苯反应呈鲜绿色，该反应需用三氯化铁和氯化铜作催化剂，反应产物在670nm处有最大吸收。RNA在20－250微克范围内，光吸收与RNA浓度 成正比。地衣酚反应特异性较差，凡是戊糖均有此反应。RNA和其他杂质也能给出类似的颜色。
RNA与浓盐酸共热时，即发生降解，形成的核糖继而转变成糠醛，后者与3， 5-二羟甲苯反应呈鲜绿色，该反应需用三氯化铁和氯化铜作催化剂，反应产物在670nm处有最大吸收。RNA在20－250微克范围内，光吸收与RNA浓度 成正比。地衣酚反应特异性较差，凡是戊糖均有此反应。RNA和其他杂质也能给出类似的颜色。
三、试剂与器材
分析天平、恒温水浴、分光光度计、沸水浴等。0.2％氢氧化钠、乙酸、95％乙醇、乙醚、地衣酚试剂
分析天平、恒温水浴、分光光度计、沸水浴等。0.2％氢氧化钠、乙酸、95％乙醇、乙醚、地衣酚试剂
四、操作方法
① 酵母RNA的提取
① 酵母RNA的提取
② RNA地衣酚法显色测定
③ 数据处理及计算。
五、关键步骤与注意事项
该法反应特异性较差，凡是戊糖均有此反应。因此，测RNA含量时可先测定DNA的含量，再计算出RNA的含量
