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酵母遗传学方法11:PCR介导基因破坏法

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PCR 介导基因破坏法

 

1. 反应混合物:

5 μ l             10 × Taq 缓冲液

5 μ l             25mmol/L MgCl2

2 μ l             10mmol/L dNTPs

10~100ng         模板 DNA

25pmols          引物(每种引物)

0.5 μ l            Taq DNA 聚合酶( 2U

2. PCR 循环参数:

94           5 分钟

94           1 分钟

55           1 分钟

72           2 分钟

10 个循环

94           1 分钟

65           1 分钟

72           2 分钟

20 个循环

72           10 分钟

 

 

 

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