补体C4溶血活性的测定(试管法)
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将豚鼠血清用水合肼或氨水处理去除其中的C4,这种C4缺乏血清(简称R4)不能使致敏的SRBC溶解,当加入含有C4的受检血清后,级联酶促反应发生即可导致致敏的SRBC溶解。溶血的程度与待测血清中C4的活性相关。
1、无补体C4-抗原抗体复合物(EAR4)的制备 在新鲜豚鼠血清中按每ml加0.15mol/L氨水0.25ml或0.75mol/L水合肼0.25ml,混合后置37℃水浴30~90min,灭活其中的C4。用1mol/LHCl调节至pH7.2备用,取5%SRBC悬液与等体积4U溶血素混合为EA,然后按EA4ml与R40.25ml混合,室温放置15rain后使用;
2、在试管中加入反应物;
3、结果判定 按CH50方法进行。正常范围为8.270±2.087U/ml。