BCA蛋白质定量检测
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· 准确灵敏:BCA试剂的蛋白质测定范围是20-2000μg/ml,采用加强方法可检测到5μg/ml;MicroBCA试剂测定范围是0.5-20μg/ml。
· 快速:45分钟内完成测定,比经典的Lowry法快4倍而且更加方便。
· 经济实用:除试管外,测定可在微孔板中进行,大大节约样品和试剂用量。
· 不受样品中离子型和非离子型去污剂影响。
· 检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考玛斯亮蓝。
基本原理:
碱性条件下,蛋白将Cu ++ 还原为Cu + ,Cu + 与BCA试剂形成紫颜色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。
BCA分子式:
原理图:
用PIERCE的BCA试剂盒所得的标准曲线:
MicroBCA蛋白标准曲线
BCA蛋白标准曲线
BCA蛋白质检测流程