请教 luciferase 的 具体操作PROTOCOL

问：

我要做LUCIFERASE 了，可是我一点概念都没有。有哪位有具体的操作PROTOCOL？

还有一些白痴问题luciferase 要检测什么呢？是把我的带有LUC的质粒转染到细胞里，然后检测它的活性？什么意思啊？

我检测它的目的是什么呢？我只知道我现在有一个LUC的质粒，老板让我准备做，我都不知道是什么目的和思路......

谢谢啦

答：

luciferase检测的是虫荧光素酶基因的表达情况，一般我们构建luciferase载体的时候是把待研究的基因装在luciferase基因的前面，从而以luciferase的表达来了解目的基因的表达情况。

至于具体的PROTOCOL，因为不了解你的实验以及细胞情况，比较难说，而且各种luciferase检测试剂也不一样。我们实验室做的是共转染构建的一段基因启动子区的luciferase表达载体和目的质粒，从而初步研究目的基因对于该启动子的作用。具体步骤：共转染至少80%汇片的贴壁细胞，然后48H把细胞消化下来，按照luciferase检测试剂的说明书上机检测。