PCR-SSO HLA分型技术
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PCR-SSO HLA 分型技术
编码不同型别HLA抗原的基因在其碱基的顺列上存在差异，这种差异能够用序列特异性寡核苷酸探针（SSO）杂交的方法来检测。其原理是根据各种HLA等位基因的碱基序列，通过人工合成与其互补的寡核苷酸，即SSO探针；待测标本基因组DNA中的HLA基因经PCR扩增之后，与SSO探针杂交，通过观察杂交发生与否，来判断待测标本的HLA型别。
传统上PCR-SSO探针的杂交方式是将经PCR扩增的待测标本DNA固定于膜上，然后用标记的各种SSO探针与之杂交，这种方法适合大量标本的检测。另一SSO探针的杂交方式为反向SSO探针杂交法，即固定在膜上的是各种HLA等位基因特异性的SSO探针，PCR扩增的样本DNA经标记后，再进行杂交，这种方法也适合少量标本的检测。
下面以HLA-DR分型说明PCR-SSO的操作过程
提取标本基因组DNA
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PCR扩增相应HLA基因
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将扩增后的DNA固定于尼龙膜上
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预杂交并与标记的SSO探针杂交
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洗膜
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显示杂交结果
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HLA型别判断
