从精子中提取DNA的方法
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步骤:
1、从棉签上取下有检材的棉花并置于1.5塑料离心管中。
2、管中加入400微升TNE缓冲液;25%微升sarcosyl(硅鱼精);75微升水;5微升蛋白酶K溶液手混匀,37度保温2小时。
3、用一新的灭菌牙签将棉花拧干后管中取出,再用12000rpm离心5分钟。
4、.移上清液(内含裂解细胞或雌性片段)于一新的15微升管,不要震荡沉淀物(内含非裂解细胞或精子),再用TNE洗脱四次。
5、在有沉淀物的管中加入10微升TNE;20%sarcosyl(硅鱼精);40微升DTT;151微升水;10微升蛋白酶K溶液;手摇混匀,37度保温2小时。