SDS-PAGE凝胶的制备过程

相关专题

 

聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE)凝胶的制备至关重要，凝胶制备不均，好好的样品就给糟蹋了，以下是SDS-PAGE胶凝胶的制备步骤。

如何配制SDS-Page 胶凝胶的制备过程：

1、 按要求装配好垂直电泳板，两块玻璃板的两侧及底部用1%的琼脂 糖封边，防止封闭不严而使聚丙烯酰胺液漏出。

2、 将装好的玻璃电泳板倾斜成45～60℃角。

3、 按表3配制所需%浓度凝胶的毫升数。

4、 加入TEMED后，立即混匀，缓缓倒入两玻璃板间的胶床中，直到液体接近溢出时为止。

5、 立即插入适当的梳子，密切注意防止梳齿下产生气泡，用一有力的夹将梳子夹在一边的玻璃板上，然后将玻璃板斜靠在物体上，使成10°角，可减少液体泄漏的机会。

6、 室温聚合一小时后，将玻璃板插入电泳槽中，上紧，倒入0.1XTBE缓冲液。

7、 小心取出梳子，加样。

How to Make an SDS-PAGE gel

Alright so here’s a quick video on how to cast an SDS-PAGE gel. Although recipes can vary, the ingredients shown here are almost always used. Remember: always add TEMED last, and pour into plates immediately after!

Already know how to make a gel, but have problems with leaky gels? Check out our other video on How to Avoid a Leaky SDS-PAGE gel.

Okay now that you know how to make it, check out this video on How to Run an SDS-PAGE gel.

注意事项：凝胶制备的过程很简单，但是凝胶一定要均匀无气泡，取出梳子的时候一定要小心，放置将胶孔戳破。