HLA分型
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分型方法:
血清学、细胞学、分子生物学方法
血清学、细胞学、分子生物学方法
1. 血清学分型法
补体介导的微量淋巴细胞毒试验
原理:
抗体(HLA分型) + 淋巴细胞(受者) + 补体淋巴细胞受损 判定结果(细胞死亡百分率)
主要应用:
检测HLA-A、B、C抗原(HLA-I类)
2. 细胞学分型法
混合淋巴细胞培养法(MLC)
原理:(不同类型的淋巴细胞会刺激对方发生分裂增殖)
淋巴细胞(供者,X 线或丝裂霉素处理) + 淋巴细胞(受者) 培养 淋巴母细胞(判定结果);
主要应用:检测DP抗原(HLA-II类)
3. 基因分型法 --- 分子生物学技术
原理:比较供、受者编码HLA抗原基因的DNA序列,判定供、受者间的相似程度。
主要方法:
(1) RFLP (限制性片段长度多态性)法
(2) PCR- RFLP法
(3) PCR-SSO(顺序特异性寡核苷酸)法àreverse hybri
(4) PCR-DNA sequencing法