外周血白细胞HLA-B27的表达

CD3 单抗 HLA-B27 单抗 全血
溶血剂 多聚甲醛
流式细胞仪

1. 取荧光素 PE 标记的 CD3 单抗及 FlTC 标记的 HLA-B27 单抗 30 μl、EDTAK₃ 抗凝的全血 50 μl，混匀后室温染色 15 min ( 或 20 min)。

2. 加溶血剂 2 ml 溶解红细胞（10 min）。

3. 1500 r/min 离心洗涤除去细胞碎片，加 1% 多聚甲醛固定 ( 15 min)。

4. 上机测定。在测完标准微球并调节好 Fl1 电压后，不可改变 FL1 的设置。通过 CD3-PE/SSC 设“门”'圈定 CD3 阳性细胞（T 淋巴细胞），检测其 B27 的平均荧光强度。如标本荧光强度小于标准微球荧光强度则为阴性，相反为阳性。

5. 给出流式细胞仪检测结果并发出实验报告。