人肺癌细胞(spc-A1、NCI-H446)传代
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都是贴壁细胞,在消化传代过程中,步骤如下:
倒尽旧的培养液->用无血清的培养基清洗一两次->加入一定量的胰酶,置于37度培养箱中5--10分钟,使细胞悬浮->显微镜下观察,待细胞大部分变圆时,回到超静台->加入一定量的含血清的新培养液,以终止胰酶作用->反复吹打细胞->再置显微镜下观察,直到细胞全部悬浮起来->吸出一部分加入新的培养瓶中->最后再补充加入一定量新的培养液。
注意:
1、吹细胞时尽量多吹边角儿,此处细胞生长的多。
2、吸出细胞前要混匀,可以剧烈震荡培养瓶。
3、我们用的是DMEM,也可以用1640。