化学合成siRNA
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在较早的哺乳动物 RNAi 实验中, siRNAs 是通过化学方法合成的,就像合成引物一样, 是应用起来最方便的一种方法,研究人员几乎不需要做什么工作。但是RNA合成成本高,定制周期长,特别是有特殊需求的RNA序列。由于价格比其他方法高出很多, 而且设计好的 siRNAs 中通常只有大约 25% 的 siRNAs 能高效抑制基因的表达(抑制效率 >80% ), 一个基因通常合成 3—5 对 siRNAs , 这使得化学合成 siRNA 的成本更高 (就是 6 — 10 条 siRNAs ,一个基因就不少于 1500USD )。如果需要重复设计,在国内还有时间上的困扰。现在,多个厂家推出了不同的试剂盒,一个试剂盒可以自行设计合成多个 siRNAs, 灵活性和可控性都明显提高,不失为一种经济的选择。 一般的做法是用先用其他方法筛选出最有效的序列后再进行化学合成。
适用: 已经找到最有效的 siRNA ,接下来需要大量 siRNA 进行研究
不适用: 筛选多个 siRNA来进行 等长时间的研究