【求助】急!化学合成的siRNA溶解是否和引物类似需要4度过夜?
丁香园论坛
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请问各位大侠,我看说明书上说化学合成的siRNA 用DEPC水震荡溶解 有位师姐建议说类似于引物需4度过夜 这样才能溶解完全 但这样会不会使得siRNA降解呢? 是否可加DEPC水溶解后立即用于转染呢?
一般操作步骤是:
1,拿到在公司合成的siRNA后,一般是干粉状得,先高速离心半分钟左右,目的是使在运输过程中飞到管壁上的粉末积聚到管底。
2,然后根据实验浓度和公司提供的说明书加适量的DEPC水进行溶解,,溶解过程中可以轻微震荡,加速溶解,因为siRNA是水溶性的,一般短时间内便可以溶解,即可使用
1,拿到在公司合成的siRNA后,一般是干粉状得,先高速离心半分钟左右,目的是使在运输过程中飞到管壁上的粉末积聚到管底。
2,然后根据实验浓度和公司提供的说明书加适量的DEPC水进行溶解,,溶解过程中可以轻微震荡,加速溶解,因为siRNA是水溶性的,一般短时间内便可以溶解,即可使用
baby_susan wrote:
一般操作步骤是:
1,拿到在公司合成的siRNA后,一般是干粉状得,先高速离心半分钟左右,目的是使在运输过程中飞到管壁上的粉末积聚到管底。
2,然后根据实验浓度和公司提供的说明书加适量的DEPC水进行溶解,,溶解过程中可以轻微震荡,加速溶解,因为siRNA是水溶性的,一般短时间内便可以溶解,即可使用
好的好的 谢谢啊!!
baby_susan wrote:
一般操作步骤是:
1,拿到在公司合成的siRNA后,一般是干粉状得,先高速离心半分钟左右,目的是使在运输过程中飞到管壁上的粉末积聚到管底。
2,然后根据实验浓度和公司提供的说明书加适量的DEPC水进行溶解,,溶解过程中可以轻微震荡,加速溶解,因为siRNA是水溶性的,一般短时间内便可以溶解,即可使用
完全同意战友意见,拿到siRNA后,先快速离心,使干粉沉于管底,再加规定体积的DEPC 水或者从公司购买的专门的siRNA resuspension buffer,轻微震荡后放室温半小时,中间间或用手指轻弹管底4~5次,重复两到三次,之后分装于多管,立即放-70度保存,一般来说siRNA还是很稳定的,只要避免反复冻融,效率不会有太大变化。
我溶解后放在了负20度,这样能用好久啊?还有你们siRNA有没有做动物实验的啊?我现在不知道动物实验siRNA的剂量应该用多少。我做裸鼠的。
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