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原生质体融合技术(仙台病毒法、聚乙二醇(PEG)法、电融合法)

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7061

一、仙台病毒法

仙台病毒诱导细胞融合经四个阶段:

①两种细胞在一起培养,加入病毒,在4℃条件下病毒附着在细胞 膜上。并使两细胞相互凝聚;

②在37℃中,病毒与细胞膜发生反应,细胞膜受到破环,此时需 要Ca2+和Mg2+,最适PH为8.0一8.2;

②细胞膜连接部穿通,周边连接部修复,此时需Ca2+和ATP;

④融合成巨大细胞,仍需ATP 。

病毒促使细胞融合的主要步骤如下:

1.两个原生质体或细胞在病毒黏结作用下彼此靠近;

2.通过病毒与原生质体或细胞膜的作用使两个细胞膜间互相渗透,胞质互相渗透;

3.两个原生质体的细胞核互相融合,两个细胞融为一体;

4.进入正常的细胞分裂途径,分裂成含有两种染色体的杂种细胞。


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