蛋白质浓缩问题——超滤浓缩管的使用及保存

1.1 浓缩样品

1、要浓缩的样品含盐量必须0.3M以上，含盐量低的样品须补加到0.3MNaCl。

2、在内管（附有3KD膜）中加入500µl样品，将内管套入外管。

3、对称放置离心管，14520rpm(即14000g)离心。（离心5min约浓缩2倍，10min约4倍，15min约6倍，20min约8倍，30min约10倍）。

4、离心结束后，将内管倒置套在另一个干净的离心管呢，3880rpm离心min收集浓缩后的样品。或者用移液器直接吸出内管中的样品。

1.2 浓缩管使用后的处理和保存

1、使用完的浓缩管，立即加入500µl含1MNaCl的缓冲液（此缓冲液与浓缩样品的缓冲液一致），8000rpm离心20min。

2、甩净内管中的盐溶液，将内管放入超纯水中浸泡1h。

3、内管加入超纯水500µl，8000rpm离心5min。

4、甩净内管中的水，加入500µl0.2MNaOH，8000rpm离心20min。

5、甩净内管中的NaOH溶液，用超纯水再8000rpm离心5min。

6、甩净内管中的水，放入含0.2-0.5‰NaN3的生理盐水中。

7、外管用自来水洗净后，用超纯水冲洗干净，晾干。

(责任编辑：大汉昆仑王)