大肠杆菌转化与感受态细胞的制备方法的研究进展

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大肠杆菌的基因工程

大肠杆菌细胞表面没有结合DNA的特异性受体存在，金属离子诱导大肠杆菌摄取外源DNA具有一定的特异性。高浓度非生理条件下Ca2+诱导大肠杆菌摄取外源DNA，可能一方面是高浓度的Ca2+聚集在细胞表面改变了细胞壁的渗透性，使转化DNA更容易接近细胞膜。另一方面少量Ca2+进入细胞与胞内的PHB和Pi结合成复合物，在细胞膜上形成新的膜通道，为DNA最终进入细胞内提供了条件。低Ca2+诱导大肠杆菌摄取DNA可能主要是后者的作用。因此，Ca2+诱导大肠杆菌建立感受态并实现DNA转化，既是一个物理化学过程，也是细胞自身生理调节的反应过程。这些研究结果对于我们探索大肠杆菌摄取外源DNA的分子机理，提高基因工程操作中将重组 DNA导入受体细胞的效率，以及正确评估大肠杆菌可能发生的水平基因转移事件具有重要意义。