兔胶体金检测技术之IGSS法操作方法与步骤

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免疫胶体金检测技术是以胶体金(常用的是铁和汞重金属离子)作为示踪标志物应用于抗原 抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金在弱调教下呈负电荷，能和带正电荷的蛋白分子结合，由于这种结合不破坏蛋白活性，而且胶体金比较容易制备，这些特点使得胶体金广泛应用各种领域。

免疫 金银法(IGSS)操作流程

1、脱蜡至0.05mol/LTBSpH7.4缓冲液。

2、抗原 修复。

3、1%卵蛋白(EA)15min，不洗。

4、特异性免疫 抗体37℃120min或4℃20小时。

5、0.05MTBS洗后改0.02MTBS(0.1%BAS)洗10min。

6、1%卵蛋白(EA)15min，不洗。

7、PAG(1：15)(10nm)室温孵育60min。

8、1%戊二醛10min;双蒸水洗5min。

9、1%明胶洗5min;银避光显影8-15min;双蒸水洗15min。

10、用固定液(15%硫酸钠、20%硫代硫酸钠混合液)固定5min。

11、1%戊二醛固定5min;温水洗。

12、核固红或甲基绿衬染，常规脱水封片。

结果：阳性物质呈黑色或黑褐色颗粒。

兔胶体金检测技术可用于免疫组化 和免疫电镜技术。这里总结了免疫金银法(IGSS)操作方法与步骤。