MTS检测细胞生长
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1. 培养 IL-2 依赖细胞株 CTLL-2 细胞或 HT-2 细胞(检测 IL-2 ),或者 IL-3 依赖细胞株 FDC-P1 细胞或 FL5.12 细胞(检测 IL-3 )到对数生长期。
2. 取 96 孔细胞培养板,每孔加 0.1ml 含 1 × 104 ~ 2 × 104 上述细胞之一的 DMEM 培养液(加 10 %小牛血清)。
3. 每孔加 0.1ml 系列稀释的待测细胞因子( IL-2 或 IL-3 )样品或细胞因子标准品,在 37 ℃ 5 % CO2 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养 24 小时。
4. 每孔加 20 μ l MTS/PMS 混合液,继续培养 3 ~ 4 小时显色。
5. 检测前摇晃培养板 10 秒钟,混匀颜色。在酶联检测仪上,波长 570nm (或 490nm ,或 570nm 和 690nm )处检测各孔的光吸收值( OD )。用样品稀释度对 OD 值( OD570 、 OD490 或 OD570 /OD690 )绘制剂量 - 反应曲线,根据标准品曲线计算样品中细胞因子的量。