检测DNA分析细胞周期
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Ⅰ、样品准备 准备以下一种或几种样品 A、组织单细胞悬浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞) B、组织培养细胞 C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞 Ⅱ、反应体系-DNA低渗缓冲液 柠檬酸三钠 0.25g Triton-X 100 0.75ml Propidium iodide 0.025g 核糖核酸酶 0.005g
蒸馏
水 250ml 我们将该DNA低渗溶液于密闭瓶子中存放数月后并无发现有任何染色活性的丢失 Ⅲ、染色 1、 每一个管子中放入1×106个细胞; 2、 样品离心后尽可能完全地移去上清液,并且不要打碎沉淀块; 3、 入1ml的DNA低渗染色缓冲液至沉淀中,并混匀; 4、 样品于4℃下避光30分钟或最长不超过1个小时以备
流式细胞仪
分析。 注意:延长在低渗
缓冲液
的曝光时间会引起样品碎片的增加。