枯草芽孢杆菌对棉花黄萎病的拮抗作用
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实验目的: 进一步掌握无菌操作技术,加深对微
生物
之间互作的进一步认识
实验原理: 枯草芽孢杆菌分泌到体外的带谢产物能够抑制棉花黄萎病的生长
供试菌株 (1) 拮抗菌株: 枯草芽孢杆菌(冰箱保存)
(2) 病原菌株: 棉花黄萎病菌(冰箱保存)
实验步骤
1. 培养基的制作
(1) PD培养液:(2) PDA培养基:查氏培养液:按上述配方配制查氏液体50 ml及固体胶培养基125 ml分别装在250的三角瓶中,121℃ 条件下灭菌30分钟。
2. 接种培养
(1) 在无菌操作条件下,将棉花黄萎病菌接种在查氏培养液中,28℃振荡培养4天。
(2) 将枯草芽孢杆菌在PD培养液中28℃培养24小时
3. 抑菌试验
(1) 平板制备:将固体PDA培养基溶化后倒入培养皿中,制成平板
(2) 棉花黄萎病菌液涂皿:将棉花黄萎病菌液用玻棒均匀的涂布在查氏平板培养基上
(3) 枯草芽孢菌的接种:将圆滤纸片放置在平板培养基上,用 吸管 吸取少许枯草芽孢杆菌菌悬液滴到 滤纸 片上 (4) 培养:28 ℃培养箱中培养4天
(5) 观察结果
实验原理: 枯草芽孢杆菌分泌到体外的带谢产物能够抑制棉花黄萎病的生长
供试菌株 (1) 拮抗菌株: 枯草芽孢杆菌(冰箱保存)
(2) 病原菌株: 棉花黄萎病菌(冰箱保存)
实验步骤
1. 培养基的制作
(1) PD培养液:(2) PDA培养基:查氏培养液:按上述配方配制查氏液体50 ml及固体胶培养基125 ml分别装在250的三角瓶中,121℃ 条件下灭菌30分钟。
2. 接种培养
(1) 在无菌操作条件下,将棉花黄萎病菌接种在查氏培养液中,28℃振荡培养4天。
(2) 将枯草芽孢杆菌在PD培养液中28℃培养24小时
3. 抑菌试验
(1) 平板制备:将固体PDA培养基溶化后倒入培养皿中,制成平板
(2) 棉花黄萎病菌液涂皿:将棉花黄萎病菌液用玻棒均匀的涂布在查氏平板培养基上
(3) 枯草芽孢菌的接种:将圆滤纸片放置在平板培养基上,用 吸管 吸取少许枯草芽孢杆菌菌悬液滴到 滤纸 片上 (4) 培养:28 ℃培养箱中培养4天
(5) 观察结果