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胶体金pH值的调整

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胶体金与蛋白质的结合成功与否,取决于pH值,一般只有在蛋白质等电点(p I )略偏碱的条件下,二者才能牢固地结合,因此,标记之前须将胶体金溶液的pH值调至标记蛋白质的等电点略偏碱。一般可用0.1mol/LK 2 CO 3 或0.1mol/L HCl调高或调低pH值。由于金溶胶会损害pH计探头,故采用pH 试纸 测定pH值。几种常用的蛋白质标记时,胶体金所用pH值见表。
胶体金合成中各种蛋白、酶的等电点
蛋白 pH
IgG 9.0
F(ab) 2 7.2
McAb 8.2
SPA 5.7-6.2
HRP 7.2-8.0
BSA 5.2-5.5
胰岛素—BSA结合物 0.6
亲和层析IgG 7.6
大豆凝集素 6.1
DNA酶 6.0
RNA酶 9.0-9.2
低密度脂蛋白 5.5
亲和素 10.0-10.6
链霉亲和素 6.4-6.8
凝集素(Lectin)I 8.0
α—球蛋白 6.0
霍乱毒素 6.9
破伤风毒素 6.9
 
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